OBTENCIÓN DE UNA CEPA RECOMBINANTE DE Escherichia coli PARA LA EXPRESIÓN DEL GEN nth DE Bacillus subtilis

Andrés Job Méndez López, Rocío del Carmen Barajas Ornelas, Mario Pedraza Reyes

Resumen


Además de las principales endonucleasasapurínicas/apirimidinicas (APEs)Nfo y ExoA; Bacillussubtilis posee una tercer proteína denominada Endonucleasa III o Nth. Esta comparte una identidad de 46.2% con la Endonucleasa III de Escherichiacoli, capaz de procesar una amplia variedad de bases oxidadas, así como sitios AP generados in vitro. Con el fin de estudiar las propiedades enzimáticas y la función fisiológica de la endonucleasa III de B. subtilis, codificada por el gen nth, el cual se expresa durante todo el ciclo de vida de esta bacteria; se obtuvo una cepa de E. coli portando una construcción para la expresión del gen y sobreproducción de una proteína Nth conteniendo una etiqueta de seis histidinas (His6) en el extremo amino-terminal. La cepa recombinante obtenida permitirá, en experimentos futuros, obtener muestras puras de la enzima His6-Nth y proceder con su caracterización estructural y bioquímica.

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Referencias


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